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發酵工业微生物菌種的分離和選育

發布時間:2013-06-13 15:42:51

從自然界中得到的微生物菌種往往産值不高,达不到出産需求。因而,大家在知道和知道微生物特性的基礎上,應用微生物遺傳變異及代謝調控理論,经過操控微生物的成長代謝條件,格外是以物理或化学要素誘發微生物驟變而發生優秀性狀,迸一步挑選出高産菌株。 分子生物学的開展、基因工程技能的應用,为發酵工业供給了更为較好的育種手法。由此不隻可以定向地進步發酵産率,而且還可得到新的工程菌株,出産微生物不能發生的各種蛋門質和肽類,如胰島素、攪擾紊等。 發酵下业運用的微生物菌種,開始都是從自然界中别離挑選出来的。要從自然界找到咱們所需求的優秀菌種,首要有必要把它們從許多的雜菌中别離出来,然後依據出産需求和菌種特性,選用各種不一樣的挑選辦法,選出功能傑出的純種。别離與挑選菌種的具體做法通常分为4個步驟,即樣品收集、增殖培育、純種别離和出産功能測定。 在自然界取得的樣品,是許多品種微生物的混雜物,通常選用平闆劃線或平闆稀釋法進行純種别離。为了添加别離成功率,可经過富集培育添加待别離菌的數最。即是運用不一樣品種的微生物其成長繁衍對環境和養分需求的不一樣,如溫度、pH、滲透壓、氧氣、碳源、氮源等,人为操控这些條件,使之利于某類或某種微生物成長,而不利于其他品種微生物的生計,以到达使意圖菌種占優勢,而得以疾速别離純化的意圖。这種辦法又被稱为施加選擇性壓力别離法。 操控培育時的氧氣,可将好氧和厭氧微生物分隔;在高溫下培育,可将嗜熱微生物和非嗜熱微生物分隔;操控不一樣的pH條件,可别離出嗜酸或嗜堿微生物;運用高糖或高鹽的培育基進行培育,可取得耐高滲透壓的微生物;控翩培育基的各種養分成分,均可使能運用此種養分的微生物被富集,然後很多取得。 在别離培育基中也廣泛選用參加不一樣的抗生素或試劑来添加選擇性。如在别離放線菌和細菌時,可參加抗真菌抗生素;别離真菌時,可參加抗細菌抗生素。培育辦法可選用分批式富集培育(搖瓶培育)和恒化式富集培育(接連培育)兩種辦法。 分批式富集培育是指将富集培育物轉接到新的同一種培育基中,從頭樹立選擇性壓力,如此重複轉種幾回後,再取此富集培育物接種到固體培育基上,以取得單菌落。这種分批式富集培育中,轉種的時刻是要害應在所需菌種占優勢情況下轉種。 恒化式富集培育技能是经過改动限制性基質的濃度,来操控兩類不一樣菌株的比成長速率。因而可经過改动稀釋速率進行接連富集培育,取得所需求的菌種。用接連富集培育技能别離出来的菌種,格外合适用于接連發酵出産,而分批式富集培育鈍化辦法别離得到的菌株,在接連發酵出産中的體現很差。 接連富集培育辦法還可以用于别離习慣某種工业出産需求特性的菌株,如能习慣簡略培育基的菌種,这樣不隻可以下降出産成本,且不易染菌。還可進步别離溫度,有可以别離出耐高溫菌株,在出産中節省冷卻水。用接連富集培育辦法也可挑選出能共生的安穩混合菌群。 固體培育基常用于别離各種酶發生菌,在固體選擇性培育基中參加酶效果的底物培育微生物,可以運用此底物的酶發生菌得以成長,而且往往會在其菌落周圍構成一通明圈。通明圈的巨細雖不能與酶生機的凹凸徹底成正比,但徹底可以作为菌種初篩的判别規範。像蛋白酶、脂肪酶、果膠酶、甘露聚糖酶、澱粉酶、纖維素酶等酶發生菌,都可用这個辦法進行挑選。 本文參考《發酵工程原理與技術》一書。
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