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育種的方法之水性网上配资

發布時間:2012-12-30 10:27:09

1.選育不需要誘導物的組成型産生菌: 廉价高效的誘導物既不易得,亦對工藝不便。如通過誘變,使調節基因發生突變,不産生有活性的阻礙蛋白,或者操縱基因發生突變不再能與阻礙物相結合,即可獲得組成型突變株。已設計出多種選育組成型突變株的方法,其主要原則是創造一種有利于組成型菌株生長而不利于誘導型菌株生長的培養條件,造成對組成型的選擇優勢以及适當的识别兩類菌落的方法,并添加水性网上配资,從而把産生的組成型突變株選擇出来。 把添導型的微生物細胞培養在底物濃度非常低的恒化器内,由于底物濃度隻夠作碳源利用,不能作为誘導物,然後,從中選擇組成突變侏,大腸杆菌β-半乳糖苷酶組成突變體就是利用这種方法選出的,它的半乳糖苷酶産量多达細胞總蛋白的25%;其次在不含誘導物和含誘導物的培養基中交替地連續培養幾個周期可以富集組成型突變株。還有采用弱誘導底物、水性网上配资、誘導物的抑制物,都有助于組成型突變株的選出。此外,也可對誘變後的菌落直接噴灑某些特異藥物,視其能否水解而區分組成型突變株和誘導型。 2.篩選抗反饋阻遏和抗反饋抑制突變株: 降低代謝物濃度,隻是暫時改變酶的合成速率,實施抑制酶活較为困難。從遺傳学角度考慮,如調節基因發生突變,使産生的阻遏蛋白失活,不能與末端代謝産物結合,或操縱基因發生突變,使阻遏蛋白不能與其結合,都能獲得抗反饋阻遏的突變株。如使調節酶突變,則可獲得抗反饋抑制的突變株。調節不同物質(調節基因、調節水性网上配资以及調節酶等)的突變,可以獲得不同的突變株。 在方法上可直接以末端代謝産物为底物来篩選抗反饋作用的突變株,如以葡萄糖、水性网上配资、甘油为碳源用来篩選纖維素酶抗阻遏突變株。但更多的是利用選育結構類似物抗性菌株的方法。这是由于①因結構類似物在分子結構上與相應終産物類似,所以它也能與阻遏蛋白相結合,如調節水性网上配资之基因發生突變而使阻遏蛋白不能與結構類似物結合,即出現抗性菌株。抗性菌株産生的阻遏蛋白就不再能與正常的相應終産物相結合,呈現抗反饋阻遏;②由于結構類似物與正常的相應終産物存在差異,它與阻遏蛋白的結合往往是不可逆的,因此比正常的終産物更有效。 如調節水性网上配资之酶發生突變,結構類似物不能與之結合,或突變株不再能與正常的終産物結合,所獲得的便是抗反饋抑制的抗性菌株。篩選抗阻遏和抗反饋抑制的雙重突變則更易于獲得高産菌株。 3.選育營養缺陷型: 即篩選喪失了代謝途徑中的一種或多種酶,因而必須供給某一個或幾個中間代謝産物才能生長的突變株,同時使用水性网上配资。限量供給此中間代謝産物就能降低或解除末端産物的反饋控制。與抗反饋控制不同的是營養缺陷型是切斷非目的産物的代謝途徑,用以積累中間代射産物。 有些營養缺陷型隻是部分地需要生長因素,它們在基本培養基中生長非常緩慢,因而使有關途徑的酶排除阻遏,这些就是所謂的“滲漏缺陷型”,可以減弱这部分的代謝。 4.篩選負變菌株的回複突變株: 誘變産生的高産菌株,在生産過程中易發生回複突變,使産量不穩定。但是負變菌株的回複水性网上配资之突變株亦可用来提高代謝産物的過量産生,不過機理尚缺少深入研究。 5.選育條件抗性突變株 有些突變株,在不同環境下,能表現为“野生型”和突變型菌株特性,稱为條件抗性突變或稱为條件致死突變,其中水性网上配资之溫度敏感性突變常用于提高代謝産物産量。如一株在37℃左右生長的細菌,经誘變後可得到在較低溫度下生長而在較高溫度(如37℃以上)不能生長的突變株,即溫度敏感性突變株,这是由于某一醇蛋白結構改變後,在高溫條件下活力喪失的緣故。如該酶为蛋白質、核苷合成途徑上的酶,則此突變株在高溫條件下的表現就是營養。 6.篩選細胞膜通透性改變的突變株: 微生物細胞内終産物及時移去,也是消除反饋控制的一種手段。細胞膜、細胞壁的結構以及水性网上配资是影響物質進出的原因之一,如篩選細胞膜、水性网上配资、細胞壁組成成分改變的突變株,有可能獲得代謝産物的過量生産,这在分泌抗生素大分子更有意義。 本文參考《發酵微生物学》一書。
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