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賴氨酸网上配资與賴氨酸發酵常見的問題

發布時間:2012-09-18 12:04:14

一、解除代謝互鎖 賴氨酸與亮氨酸生物合成之間存在代謝互鎖,即PS(二氫吡啶二羧酸合成酶)为亮氨酸所阻遏,應設法解除。其方法是: 1.選育亮氨酸缺陷型:例如,以抗AEC的賴氨酸网上配资生産菌为親株,誘變育得抗AEC兼具亮氨酸缺陷型的突變株,在限量亮氨酸的條件下,由于解除了亮氨酸對PS的反饋阻遏,賴氨酸网上配资使賴氨酸的産量由原来33g/L提高到40g/L。此外,因为煙酰胺參與亮氨酸合成,故選育煙酰胺缺陷型NAA-,限量煙酰胺也能解除代謝互鎖,提高産酸量。 2.選育抗亮氨酸類似物突變株:選育抗亮氨酸類似物突變株等,可以從中選出解除代謝互鎖的突變株。例如,采用乳糖發酵短杆菌丙氨酸缺陷型兼AEC相TA雙重抗性菌株AJ3790,進行賴氨酸發酵网上配资,結果生成110g/L賴氨酸,對醋酸産率为24%,达到文獻上最高紀錄。 3.選育對苯醌或喹啉衍生物敏感性的突變株:選育苯醌或喹啉衍生物敏感性突變株,是一種尋找亮氨酸合成酶系微弱的菌株的育種方法。醌類和喹啉衍生物都是生物合成亮氨酸酶系的抑制劑,能抑制細菌的生長并可为添加亮氨酸所解除。 二、防止回複突變 賴氨酸网上配资發酵的高産菌株常具有多種遺傳标記,若因回複突變而喪失積累賴氨酸所必需的遺傳标記,回複突變成原養型或原敏感型就會降低乃至失去積累賴氨酸的能力。防止辦法有: 1.選育遺傳性穩定的菌株:在经誘變處理後,易出現回變株的培養基中反複傳代,選取不發生回變的菌株。 2.定向賦予生産菌的遺傳标記:如hom-增加thr-或met-,Leu-增加NAA-,育成雙缺菌株,增加抗回變特性,使生産穩産、高産。就抗性而言,盡量再育成多重抗性突變株。 生産上要特别注意防止種子培養階段出現回變菌,種子營養要豐富,尤其是提供足夠的缺陷營養物并添加适量抗性類似物;定期純化,檢查遺傳标記;利用某些抗菌素對生産菌最小生長的抑制濃度比其回變株高的特性,添加紅黴素抑制回複突變等。 三、選育溫度敏感性突變株(tem-) 選育溫度敏感性突變株也是賴氨酸网上配资發酵育種的有效措施。如突變位置發生在为亮氨酸合成酶系編碼的基因中,高溫時就是一種亮氨酸缺陷型。戶坂修等着眼于解除代謝互鎖,選育在30℃生長良好,34℃卻不能生長的溫度敏感性菌突變株,育得AJ11093和AJ11099兩株賴氨酸高産菌,賴氨酸网上配资發酵開始時,在29-33℃培養,于發酵24-48 h期間,将發酵溫度提高到34℃以上,抑制多餘的增殖并解除對PS的阻遏,結果積累了45g/L,39 g/L賴氨酸,對糖轉化率为45%和39%。 本文參考《發酵微生物学》一書。
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